Слайд 3.

Общий ана́лиз мочи́ - лабораторное исследование мочи, проводимое для нужд медицинской практики, как правило, с диагностической целью. Включает органолептическое, физико-химическое и биохимическое исследования, а также микробиологическое исследование и микроскопическое изучение мочевого осадка.

Правила сбора мочи

Для анализа следует использовать утреннюю мочу, которая в течение ночи собирается в мочевом пузыре, что позволяет исследуемые параметры считать объективными. Перед сбором обязательно следует сначала промыть половые органы, затем сделать их тщательный туалет. Для сбора предпочтительно использовать промышленно произведенные стерильные контейнеры для биопроб, которые можно купить в аптеке. Для анализа собирается обычная утренняя моча (не только средняя порция)[источник?]. Анализ должен быть выполнен в течение 1,5 часов после сбора мочи.

Перед сдачей мочи на анализ запрещается применение лекарственных препаратов, так как некоторые из них оказывают влияние на результаты биохимических исследований мочи.

Транспортировка мочи должна производиться только при плюсовой температуре, в противном случае выпадающие в осадок соли могут быть интерпретированы как проявление почечной патологии, либо совершенно затруднят процесс исследования. В таком случае («перемороженная моча») анализ придется повторить.

В клиническом анализе мочи присутствуют множество различных показателей. Все их можно разделить на три основные группы:

·Показатели физических свойств биологической жидкости, выделяемой почками.

·Наличие в моче органических веществ.

·Мочевой осадок.

Суточный диурез, относительная плотность

·Полиурия – суточный диурез превышает 2 литра.

·Олигурия – суточный диурез менее 500–300 мл.

· Анурия – прекращение мочеотделения (суточный диурез менее 100 мл).

Ишурия – задержка мочи в мочевом пузыре. Относительная плотность зависит от объема выделенной мочи.

· Суточный диурез, относительная плотность

·Полиурия при сахарном или несахарном диабете, пиелонефрите, нефросклерозе

· Олигурия при ОПН, ХПН, гломерулонефрите, нефротическом синдроме, частичной обтурации мочеточников.

Анурия при тяжёлых поражениях почек вследствие ОПН, ХПН.

·Полиурия в период схождения отеков, при гипергидратации, гиперкортицизме.

· Олигурия при отеках, дегидратации (диарее, рвоте, ожогах, кровопотерях), глубоких расстройствах сердечно – сосудистой деятельности.

·Анурия при травмах живота, остром перитоните, отравлениях.

К физическим свойствам мочи относятся её цвет, запах, прозрачность, плотность и кислотность.

Цвет и прозрачность

В норме цвет определяется веществами, образующимися из пигментов крови, так же он зависит от красящих веществ, поступающих с пищей. Чем интенсивней желтый цвет, тем выше относительная плотность и наоборот. Прозрачность зависит от форменных элементов, солей, слизей.

определяются лаборантами на глаз, относительная плотность измеряется с помощью теста-полоски, либо прибором урометром.

Для определения кислотности мочевой среды также применяется тест в виде специальной полоски.

Какой у мочи запах – определяют простым способом вынюхивания.

Каждый показатель рассматривается в сравнении с эталоном нормы. Так, в норме моча по цвету должна быть желтой, независимо от насыщенности цвета и его оттенков. Это может быть янтарный желтый цвет или светло-желтый, или густой желтый.

На цвет мочи оказывает влияние её плотность. Чем выше плотность, тем насыщенней желтая окраска биологической жидкости. Нетипичный для себя цвет моча приобретает под действием определенной пищи или лекарственных веществ.

Лекарства могут изменять окраску мочи на зеленый, коричневый, красный и даже черный цвет. В частности, лекарства, содержащие железо, а также амидопирин и антипирин превращают цвет мочи в оттенки розового или коричневого. А введенный в организм любым путем метиленовый синий – в оттенки синего цвета.

Разная пища провоцирует возникновение различной цветовой гаммы человеческой мочи. Ревень и лавровый лист в больших количествах могут окрасить мочу в коричневый или зеленый цвет. Коричневой или красной делают её свекла и морковь. Данные изменения не относятся к патологическим, а считаются нормой.

Цвет и прозрачность

Тёмно-жёлтый при застойной почке, отеках; бледный при сахарном и несахарном диабете; красный при почечной колике, инфаркте почки; «мясных помоев» при остром нефрите; черный при гемолитической почке; разные оттенки коричневого при наличии желчных пигментов.

Цвет и прозрачность

Молочно-белый при наличии капель жира, гноя, фосфатов или лимфы;

зеленовато-жёлтый при пиурии;

грязно–коричневый – пиурия при щелочной реакции;

почти чёрный при алкаптонурии, меланосаркоме.

Помутнение за счет эритроцитов, лейкоцитов, жира, солей, бактерий.

Цвет мочи при желтухах:

гемолитическая – тёмно-бурый (за счет уробилиногенурии);

паренхиматозная – зеленовато-бурый (или «цвета нива» при билирубинурии и уробилиногенурии);

обтурационная – зеленовато–жёлтый (при билирубинурии).

Прозрачность безо всякой мути присуща свежей моче здорового организма. Чем дольше биологическая почечная жидкость выстаивается, тем больше в ней появляется помутнения. Это обусловлено содержанием в моче различных солей и является нормой.

По относительной плотности мочи судят о концентрационных характеристиках почек. Это весьма важный показатель, который может физиологически меняться при наличии рвоты или поноса, сопровождающихся обезвоживанием организма. Уменьшает плотность мочи овощной и фруктовый рацион питания, а увеличивает – потребление мяса в больших количествах.Норматив относительной плотности для здорового человека колеблется в значениях от 1003 до 1028 единиц.

Кислотность мочи обозначается буквами рН и в норме равняется семи, то есть является нейтральной. Нейтральная кислотность мочи характерна при смешанном питательном рационе, когда в пище присутствует и мясная, и овощная пища, а также хлебобулочные изделия. Нормальная кислотность для детей и взрослых может колебаться в пределах 5-7 единиц, что соответствует слабокислой среде. Грудные дети, которых кормят пока еще молоком, могут иметь как нейтральную, так и щелочную мочевую среду.

Более семи единиц показатель кислотности мочи увеличивают черный хлеб, щелочные минеральные воды, сода, насыщенность пищи овощами. Нахождение посуды с мочой долго на открытом воздухе также смещает реакцию мочевой среды в сторону щелочной. Сильнее окисляется мочевая среда от белого хлеба и большого количества жиров в пище, от избыточности в рационе продуктов с высоким содержанием белка, от тяжелых физических нагрузок и голодания.

·Органические вещества в моче

Общий анализ мочи предполагает также выявление с помощью тестов-полосок и современного лабораторного оборудования наличия в его содержимом органических веществ. В качестве оборудования используются автоматические анализаторы, позволяющие сразу узнать, в какой концентрации находятся в биологической жидкости следующие вещества:

·Билирубин.

·Кетоновые тела.

·Глюкоза.

·Желчные пигменты (кислоты).

·Индикан.

·Уробилиноген.

Полоски для проведения тестов концентрации не показывают. Благодаря им можно лишь узнать наличие или отсутствие органики в составе мочи. При положительной реакции тестовой полоски на какое-либо вещество дальнейшее тестирование позволяет определить процент его содержания.

Из перечисленных выше ингредиентов в нормальной здоровой моче должны присутствовать только белок и уробилиноген. Причем в норме концентрация уробилиногена находится в рамках 6-10 мкмоль в сутки, а концентрация белка не должна превышать 0,03 грамма.

Появление высокого белка в моче может быть спровоцировано бактериями, лейкоцитами и эритроцитами, а также спермой. Влияние на усиление степени концентрации белка оказывают также сильные, на пороге стресса, эмоции, физические нагрузки и резкие перепады температур, при которых организм человека либо переохлаждается, либо перегревается.

Глюкоза и кетоновые тела

Глюкоза и кетоновые тела в моче не определяются. Почечный порог для глюкозы крови – 8,9 ммоль/л. Однако, глюкозурия зависит не только от гипергликемии, но и от соотношения количества профильтровавшейся и реабсорбируемой в канальцах клубочков глюкозы за 1 минуту.

Глюкозурия при сахарном диабете и ряде эндокринных заболеваний; состояниях, сопровождающихся гипергликемией (патологии печени, поджелудочной железы, ЦНС).

Кетонурия при диабетическом кетоацидозе, патологии ЦНС, нервно-артритической аномалии конституции.

Желчные пигменты

В моче при гемолитической желтухе билирубин не изменен, уробилиноген резко повышен;

при паренхиматозной желтухе билирубин резко повышен, уробилиниген значительно повышен;

при механической – билирубин (связанный) повышен, уробилиноген не изменен.

Билирубинурия при поражениях паренхимы печени различного происхождения, нарушениях оттока желчи и ее застое.

Уробилинурия при поражениях паренхимы печени (при гепатитах еще в дожелтушный период), гемолизе, обтурации желчных путей при их инфицировании.

Индикан – это продукт соединения органического вещества индоксила с серной кислотой и калием. Он образуется в тонком кишечнике в результате гниения белков и в небольшом количестве выделяется с мочой.

В моче здорового человека титр индикана неуловим.

Для чего определяют наличие индикана в моче

1. Для диагностики острых заболеваний кишечника: в случае острого заболевания (особенно непроходимости) тонкого кишечника уровень индикана возрастает в первые дни, а проблемы с толстым кишечником не сопровождаются индиканурией до 4 дней. 2. Для диагностики нарушения обмена веществ.

Ииндикан в моче определяется в случаях:

·при длительных запорах

·при болезнях кишечника, сопровождающихся распадом белка (гнилостные и гнойные процессы, абсцессы, онкологические заболевания).

·при гнойных процессах в организме, перитоните, гангрене, распаде опухолей.

·при заболеваниях эндокринной системы: сахарный диабет, подагра

·Мочевой осадок – элементы мочевого осадка

Мочевой осадок исследуется при обработке анализа мочи в последнюю очередь. Чтобы его проще было получить, остаток биологической почечной жидкости пропускают через центрифугу. Затем под микроскопом рассматривают полученное содержимое осадка и выясняют, имеются ли там:

· Эпителий.

· Слизь.

· Частицы бактериального происхождения.

· Солевые кристаллы.

· Лейкоциты.

· Эритроциты.

·Цилиндры.

Эпителий в мочевом осадке может содержаться плоский (из мочеиспускательного
канала), почечный и переходный (из почек, мочевого пузыря и мочеточников). В норме почечный эпителий должен отсутствовать. А клеток плоского и переходного эпителия в здоровом анализе, как у мужчин, так и у женщин наблюдается не более трёх штук. Если при заборе анализа не соблюдались элементарные гигиенические правила, число плоских эпителиальных клеток возрастает. Выявление в анализе почечного эпителия говорит о заболевании почек.

То же относится и к слизи. В норме она в общем анализе отсутствует. Если в моче найдена слизь – надо искать патологию мочеполовых органов.

Бактерий здоровые женщины и мужчины также не имеют в моче. Появление частиц бактериального происхождения в клиническом анализе биологической жидкости свидетельствует о наличии в организме воспалительного инфекционного процесса.
Кристаллы солей в норме должны находиться в моче. Их количество зависит от рациона питания человека и от того, сколько в сутки он выпивает чистой питьевой воды.

Соли, выпадающие в нормальный мочевой осадок – это ураты, оксалаты и триппельфосфаты.

Лейкоциты в нормальной моче также должны присутствовать. У здоровых мужчин их в норме от 0 до 3 в одном поле зрения, у здоровых женщин несколько больше – от 0 до 5. Рост числа лейкоцитов выше нормального говорит о текущей в организме болезни.

Эритроциты в анализе мочи здоровых людей, напротив, должны отсутствовать. Максимально допустимы единичные эритроциты, выявляемые в нескольких полях зрения. Появление в моче эритроцитов может носить как патологический, так и физиологический характер. Физиологическими причинами являются приём некоторых лекарственных препаратов, долгое стояние на месте, длительная пешая ходьба и чрезмерные физические нагрузки. При исключении физиологических причин патологические факторы являются тревожным сигналом заболевания внутренних органов.

Цилиндры в нормальном клиническом анализе мочи могут находиться только гиалиновые. На их появление влияют напряженные спортивные тренировки или тяжелая физическая работа, обливания холодной водой, работа в горячих цехах или нахождение человека в условиях жары. Всех остальных видов цилиндров в здоровой моче быть не должно.

К ним относятся цилиндры:

· Эритроцитарные.

· Лейкоцитарные.

· Эпителиальные.

· Восковидные.

·Зернистые.

Эритроциты

Значительная примесь эритроцитов в моче – гематурия – обнаруживается визуально (моча бурого цвета при кислой реакции и красного при щелочной или нейтральной); сравнительно небольшое количество эритроцитов выявляется при микроскопическом исследовании осадка.

Гематурия при болезнях почек и мочевыводящих путей (острых и хронических гломерулонефритах и пиелонефритах, опухолях, инфекциях, пиелите, мочекаменной болезни, гидронефрозе, поликистозе почек, туберкулёзе, травмах, аденоме предстательной железы, уретрите и др.)

Гематурия при недостаточности кровообращения с выраженными застойными явлениями, гипертонической болезни, нарушениях свертывания крови, опухолях кишечника, геморрагической лихорадке, малярии, инфекционном мононуклеозе, эндокардите, подагре, сальпингите.

Лейкоциты

Увеличение лейкоцитов в моче выше нормы – лейкоцитурия. Обнаружение более 50 лейкоцитов в поле зрения называется пиурией. Обычная микроскопия не всегда позволяет выявлять лейкоцитурию, поэтому применяются пробы Каковского-Аддиса, Амбурже, Нечипоренко.

Лейкоцитурия при инфекционных и воспалительных процессах урогенитального тракта (острых и хронических пиело- и гломерулонефритах, амилоидозе почек, пиелитах, циститах, уретритах и др.).

Пиурия характерна для острой инфекции (выявляются и бактерии в моче).

Лейкоцитурия при лихорадочных состояниях.

Значительная пиурия может быть следствием прорыва абсцесса из почки или мочевых путей.

Пиурия на фоне повторных стерильных посевов мочи может указывать на туберкулёз почек или волчаночный нефрит.

Цилиндры

Цилиндры являются слепками почечных канальцев белкового или клеточного состава. Определение типов цилиндров и содержащихся в них включений позволяет отличить первичное поражение почек от заболеваний нижнего отдела урогенитального тракта.

Гиалиновые при пиелонефрите, мочекаменной болезни;лейкоцитарные при пиелонефрите; эритроцитарные при гломерулонефрите; зернистые при гломерулонефрите, диабетической нефропатии, пиелонефрите; эпителиальные при остром некрозе почечных канальцев.

Эритроцитарные при инфаркте почек, тромбозе почечных вен;

лейкоцитарные при волчаночном нефрите;

зернистые при застойной почке, вирусных заболеваниях;

эпителиальные при амилоидозе, отравлениях тяжёлыми металлами, салицилатами;

жировые при травмах скелета.

Эпителий

Эпителиальные клетки имеют различную структуру в зависимости от их происхождения в мочевыводящих путях. В мочевом осадке у здоровых людей встречаются клетки плоского и переходного эпителия от единичных в препарате, до единичных в поле зрения.

Увеличение количества переходного эпителия при инфекциях мочевыводящих путей, мочекаменной болезни, предраке или раке мочевого пузыря; появление почечного (канальцевого) эпителия при гломерулонефрите или пиелонефрите, остром канальцевом некрозе, нефросклерозе

Увеличение количества плоского эпителия при предраке или росте мочевого пузыря; почечного эпителия при различных нефропатиях, отравлениях салицилатами или солями тяжёлых металлов, застойной сердечной недостаточности, отторжении почечного трансплантанта.

Цилиндры

Гиалиновые при заболеваниях, сопровождающихся клубочковой протеинурией;

эритроцитарные – при патологии клубочков;

лейкоцитарные – при канальцево-интерстициальном поражении;

зернистые и эпителиальные – при острых дегенеративных поражениях канальцев.

Эпителий

1.Обнаружение в моче клеток почечного эпителия в сочетании с цилиндрами свидетельствует о тяжелом поражении почек.

2. Плоский эпителии может у женщин попадать в мочу из влагалища или наружных половых «органов.

Неорганический осадок

Кристаллы и аморфные тела являются осадком неорганических солей. Присутствие кристаллов солей в осадке мочи, прежде всего, указывает на изменение реакции мочи в кислую (ураты) или щелочную (фосфаты) стороны; появление оксалатов возможно при любой pH мочи.

Ураты при нефритах, ХПН, мочекислом диатезе, миелопролиферативных заболеваниях, ожогах; трипельфосфаты при циститах; фосфат кальция при ревматизме, анемиях; оксалаты при тяжёлых хронических заболеваниях почек; холестерин при амилоидозе, туберкулёзе.

Неорганический осадок

Выпадение солей способствует образованию мочевых конкрементов и развитию мочекаменной болезни.

Чаще встречаются камни из оксалатов, реже из фосфатов и уратов.

Однако, в большинстве случаев образуются камни смешанного состава с преобладаниями тех или иных солей.

Ураты при подагре (у 16 % больных), лихорадочных состояниях, гиповолемии при диарее или рвоте, распаде опухолей;

фосфаты – при гиперпаратиреозе;

оксалаты при отравлении этиленгликолем;

холестерин при разрыве лимфатического сосуда в почечную лоханку.

БИОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

Биохимический анализ мочи позволяет оценить функционирование почек и других органов, выявить отклонения в обмене веществ. При анализе исследуется содержание таких компонентов, как:

α-амилаза

С мочой выделяется в основном панкреатическая амилаза, что важно для оценки функционального состояния поджелудочной железы. Однако, так как выход амилазы в мочу связан с функцией почек, гиперамилазурия не во всех случаях служит точным показателем диагноза.

Увеличение активности при остром панкреатите, обострении хронического панкреатита, закупорке поджелудочной железы.

Снижение активности при некрозе поджелудочной железы, хроническом склерозирующем панкреатите, почечной недостаточности, тиреотоксикозе.

После того, как активность а–амилазы в крови после приступа панкреатита возвратится к норме, она может оставаться повышенной в моче до 7 суток. 2. Учитывая колебания экскреции а–амилазы, оптимально исследовать активность фермента в моче, собранной за сутки.

Увеличение активности при перфорации язвы двенадцатиперстной кишки, обострении хронического гепатита, желчекаменной болезни, жировой дистрофии печени, заболеваниях слюнных желез.

Снижение активности при макроамилаземии, позднем токсикозе беременности.

Индикан. Индол по воротной вене попадает в печень, где подвергается обезвреживанию путем связывания с серной кислотой, в результате чего образуется животный индикан. Реакцию катализирует ФАФС - 3-фосфоаденозин-5-фосфосульфат. В норме в крови индикан составляет 1,19-3,18 мкМ/л, в моче обычными методами не определяется, т.к. ниже 0,47 мМ в сутки.

Определение уровня индикана в сыворотке является важным показателем недостаточности функции почек. При хронических нефритах увеличение содержания индикана в крови точнее отражает степень почечной недостаточности, чем сведения о мочевине и остаточном азоте. Содержание индикана повышается при запорах, кишечной непроходимости, усиленном распаде белков (опухоли, эмпиема, бронхоэктатическая болезнь, абсцессы). В моче индикан выявляется при кишечной непроходимости, перитоните, гангрене, туберкулезе, раке желудка, брюшном тифе.

Билет№21

Основные типы превращений аминокислот в тканях(дезаминирование, трансаминирование. декарбоксилирование)

1)Дезаминирование. 4 вида. Во всех случаях аминая группа АК осв.в виде аммиака:

Продукты: жир.к-ты, оксик-ты, непред.АК, кеток-ты.

Первая стадия окислительного дезаминирования(в тканях только это!) предполагает ок-е АК путем дегидрирования. В тканях при физиологич.знач.рН(7,3-7,4) активна только 1 L-оксидаза – глутамат-ДГ;ее небелковым компонентом является НАД или НАДФ. Оксидазы остальных АК активны только про рН=10, а при этом они неактивны.(в кач.небелк.компонента имеют ФМН) – прямому ок-ному дезаминированию подверг.только глутамат.

Непрямое дезаминирование.

1. Трансаминирование

Декарбоксилирование

1. α-Декарбоксилирование, характерное для тканей животных, при котором от аминокислот отщепляется карбоксильная группа, стоящая по соседству с α-углеродным атомом. Продуктами реакции являются СО 2 и биогенные амины:

ω-Декарбоксилирование, свойственное микроорганизмам. Например, из аспарагиновой кислоты этим путем образуется α-аланин:

Декарбоксилирование, связанное с реакцией трансаминирования:

Декарбоксилирование, связанное с реакцией конденсации двух молекул:

Реакции декарбоксилирования в отличие от других процессов промежуточного обмена аминокислот являются необратимыми. Они катализируются специфическими ферментами – декарбоксилазами аминокислот

Стерины, стериды, их представители. Биологическая роль холестерина как предшественника других стеринов.

СТЕРИНЫ (стеролы), алициклич. прир. спирты, относящиеся к стероидам; составная часть неомыляемой фракции животных и растит.липидов.

Стерины присутствуют практически во всех тканях животных и растений и являются наиб. распространенными представителямистероидов в природе. В зависимости от источника подразделяются на животные (зоостерины), растительные (фитостерины), стерины грибов (микостерины) и микроорганизмов.

Холестерин (cholesterol) - Тетрациклический ненасыщенный спирт из класса стероидов, важнейший представитель стеринов, являющийся в организме предшественником желчных кислот, кортикостероидов, половых гормонов, кальциферола и т.д. Нарушение обмена холестерина лежит в основе ряда генетически обусловленных заболеваний.

Длястеринов характерно наличие гидроксильной группы в положении 3, а также боковой цепи в положении 17. У важнейшего представителя стеринов – холестерина – все кольца находятся в транс-положении; кроме того, он имеет двойную связь между 5-м и 6-м углероднымиатомами. Следовательно, холестерин является ненасыщенным спиртом:

Каждая клетка в организме млекопитающих содержит холестерин. Находясь в составе мембран клеток, неэтерифицированныйхолестерин вместе с фосфолипидами и белками обеспечивает избирательную проницаемость клеточной мембраны и оказывает регулирующее влияние на состояние мембраны и на активность связанных с ней ферментов. В цитоплазме холестерин находится преимущественно в виде эфиров с жирными кислотами, образующих мелкие капли – так называемые вакуоли. В плазме крови как неэтерифицированный, так и этерифицированный холестерин транспортируется в составе липопротеинов.

Холестерин – источник образования в организме млекопитающих желчных кислот, а также стероидных гормонов (половых и кортикоидных). Холестерин, а точнее продукт его окисления – 7-дегидрохолестерин, под действием УФ-лучей в коже превращается в витамин D 3 .

Холестерин находится в животных, но не в растительных жирах. В растениях и дрожжах содержатся близкие по структуре к холестерину соединения, в том числе эргостерин.

Эргостерин – предшественник витамина D. После воздействия на эрго-стерин УФ-лучами он приобретает свойство оказывать противорахитное действие (при раскрытии кольца В).

Восстановление двойной связи в молекуле холестерина приводит к образованию копростерина (копростанола). Копростерин находится в составе фекалий и образуется в результате восстановления бактериями кишечной микрофлоры двойной связи в холестерине междуатомами С 5 и С 6

Указанные стерины в отличие от холестерина очень плохо всасываются в кишечнике и потому обнаруживаются в тканях человека в следовых количествах.Стериды - сложные эфиры высших жирных кислот со стеринами.

Витамин С. Химическая природа, распространение. участие в обменных процессах.

Водорастворимый. Антискорбутный/аскорбиновая кислота. Сут.потр. 75-120мг. Салат, капуста, укроп, черная смородина, шиповник, картофель.

Биологич.роль: окисление НАДН. Участиев ОВР, р.гидроксилирования пролина, лизина, при синтезе коллагена, гормнов коры надпочечников, трп; синтез катехоламинов(адренал). Антиоксидант: блокир.своб.радикалы. В обмене железа, включ.его в трансферрин. Образование желч.кислот.

Авитаминоз:поражение сосудистой стенки, опорных тканей; уменьш.массы тела, общая слабость, одышка, цинга. Скорбут. Гнойные воспаления.

Парные соединения мочи.

микробные ферменты кишечника вызывают постепенное разрушение боковых цепей циклических аминокислот, в частноститирозина и триптофана, с образованием ядовитых продуктов обмена – соответственно крезола и фенола, скатола и индола.

После всасывания эти продукты через воротную вену попадают в печень, где подвергаются обезвреживанию путем химического связывания с серной или глюкуроновой кислотой с образованием нетоксичных, так называемых парных, кислот (например, фенолсернаякислота или ска-токсилсерная кислота). Последние выделяются с мочой.

Индол (как и скатол) предварительно подвергается окислению в индоксил (соответственно скатоксил), который взаимодействует непосредственно в ферментативной реакции с ФАФС или с УДФГК. Так, индол связывается в виде эфиросерной кислоты. Калиевая соль этой кислоты получила название животного индикана, который выводится с мочой. По количеству индикана в моче человека можно судить не только о скорости процесса гниения белков в кишечнике, но и о функциональном состоянии печени. О функции печени и ее роли в обезвреживании токсичных продуктов часто также судят по скорости образования и выделения гиппуровой кислоты с мочой после приема бензойной кислоты

Билет№22

Непрямое дезаминирование аминокислот, биологическое значение. Роль глутаматдегидрогеназы. Виды аминотрансфераз, их специфичность.

Непрямое дезаминирование.

1)Трансаминирование

АК + альфа-КГ аминотрансфераза, вит.В6альфа-кеток-та + глутамат

Механизм: 1. АК+ФП  альфа-кетокта + ФП-амин

ФП-амин + альфа-КГ  ФП +глутамат

Аминотрансферазы облад.субстратной специфичностью:

Ала+-КГ АЛТ, В6  ПВК / глутамат

Аспартат +-КГ АСТ, В6  оксалоацетат +глутамат

2)окислительное дезаминирование глутамата

Роль: - синтез заменимых АК

Т-первая реакция непрямого дезаминирования с образованием кетокислот, к-рые используются на гюконеогенез, или окисляются в ЦТК

Р.обратимы;их можно рассм.как р.анаболизма, так и катаболизма.

В тканях при физиологич.знач.рН(7,3-7,4) активна только 1 L-оксидаза – глутамат-ДГ;ее небелковым компонентом является НАД или НАДФ. Оксидазы остальных АК активны только про рН=10, а при этом они неактивны.(в кач.небелк.компонента имеют ФМН) – прямому ок-ному дезаминированию подверг.только глутамат.

Переваривание и всасывание простых и сложных липидов в ЖКТ. Возрастные особенности.

Витамин В1. Химическая природа, распространение, участие в обменных процессах.

Водорастворимый. Антиневритный/тиамин. Сут.потребность 1,2-2,2мг. Растительная пища, дрожжи, пшенич.хлеб, хлеб.злаки, соя, фасоль, горох, печень, почки, могз. Активная форма – тиаминпирофосфат.

В форме ТПФ входит в состав 4 ферментов, участвующих в промежут.обмене веществ. ТПФ входит в состав 2 сложных ферментных систем1)пируват, 2)альфа-кетоглутарат-дегидрогеназных комплексов, катализирующих окислительное декарбоксилирование ПВК и альфа-КГ кислот.

Авитаминоз: бери-бери(симптом Вернике - энцефалопатия)/синдром Вейса(поражение ССС); нарушения деятельности НС, ССС, ЖКТ. Симптомы: наруш.мотор.и секретор.ф.ЖКТ(потеря аппетита, атония кишечника); потеря памяти, галлюцинации, одышка, сердцебиение, боли в обл.сердца, далее дегенеративые изменения нерв.окончаний и проводящих пучков, контрактуры, параличи;сердец.недостаточность.

Минеральные вещества мочи.

Ионы натрия и хлора. В норме около 90% принятых с пищей хлоридов выделяется с мочой (8–15 г NaCl в сутки). При ряде патологических состояний (хронический нефрит, диарея, острый суставной ревматизм и др.) выведение хлоридов с мочой может быть снижено. Максимальная концентрация ионов Na + и Сl – (в моче по 340 ммоль/л) может наблюдаться после введения в организм больших количеств гипертонического раствора.

Ионы калия, кальция и магния. Многие исследователи считают, что практически все количество ионов калия, которое имеется в клубочковом фильтрате, всасывается обратно из первичной мочи в проксимальном сегменте нефрона. В дистальном сегменте происходит секреция ионов калия, которая в основном связана с обменом между ионами калия и водорода. Следовательно, обеднениеорганизма калием сопровождается выделением кислой мочи.

Ионы Са 2+ и Mg 2+ выводятся через почки в небольшом количестве (см. табл. 18.1). Принято считать, что с мочой выделяется лишь около 30% всего количества ионов Са 2+ и Mg 2+ , подлежащего удалению из организма. Основная масса щелочноземельных металловвыводится с калом.

Бикарбонаты, фосфаты и сульфаты. Количество бикарбонатов в моче в значительной мере коррелирует с величиной рН мочи. При рН 5,6 с мочой выделяется 0,5 ммоль/л, при рН 6,6 – 6 ммоль/л, при рН 7,8 – 9,3 ммоль/л бикарбонатов. Уровень бикарбонатовповышается при алкалозе и понижается при ацидозе. Обычно с мочой выводится менее 50% всего количества выделяемых организмомфосфатов. При ацидозе выведение фосфатов с мочой возрастает. Повышается содержание фосфатов в моче при гиперфункции паращитовидных желез. Введение в организм витамина D снижает выделение фосфатов с мочой.

Аммиак. Как отмечалось, существует специальный механизм образования аммиака из глутамина при участии фермента глутаминазы, которая в большом количестве содержится в почках. Аммиак выводится с мочой в виде аммонийных солей. Содержание последних вмоче человека в определенной степени отражает кислотно-основное равновесие. При ацидозе их количество в моче увеличивается, а при алкалозе снижается. Содержание аммонийных солей в моче может быть снижено при нарушении в почках процессов образованияаммиака из глутамина.

Билет№23

Образование и обезвреживание аммиака. Биосинтез мочевины, последовательность реакций. Роль печени в мочевинообразовании. Возрастные особенности.

Источники аммиака:

1)дезаминирование АК(в тканях и кишечнике)

2)дезаминирование аминов

3)дезаминирование азотистых оснований

Аммиак в крови – 12-65мкмоль/л(10-120мкг%), в моче – 35,7 – 71,4ммоль/сут(0,5-1,0г)

Аммиак исключительно токсичен.

Обезвреживание:

1)образование амидов(локально)

Гутамат + NH3,NH4+,АТФ, магний++, глутамин-синтетазаглутамин +АДФ +Фн

Глутаминпочки(–аммиак, глутаминаза) Глутамат -аммиак2аммоний+аммониогенез

альфа-КГ

печень, синтез мочевины

синтез пуринов, пиримидинов.

2)восстановительное аминирование

А. альфа-КГ (глутаматДГ, аммоний, 2Н, НАДФ)глутамат, Н2О, НАДФН

Б. глутамат + ПВК (трансаминирование)альфа-КГ +ала

3)образование аммонийных солей

4)синтез мочевины.

Судьба всосавшихся простых и сложных липидов. Жировые депо. Липотропные вещества и их роль.

Витамин В2. Химическая природа, распространение, участие в обменных процессах.

Рибофлавин/лактофлавин(из молока)/гепатофлавин(из печени)/овофлавин(из белка яиц)/вердофлавин(из растений)

Потребность – 1,7мг – взрослые. Увеличивается в пожилом возр.и при тяжелой физич.нагрузке. Дрожжи, хлеб, семена злаков, яйца, молоко, мясо, свежие овощи.

Актив.форма – флавинадениндинуклеотид ФАД, ФМН(моно-).

Вход.в состав флавин.коферментов; ФМН и ФАД(просетич.группа ферментов-флавопротеидов), р.дегидрирования, биологическое окисление.

Авитаминоз: остановка роста, выпадение волос(алопеция); воспалит.процессы полости рта, слиз.об.языка(глоссит), губ, углов рта, эпителия кожи. Кератиты глаз, катаракта; общая мышечная слабость и слабость сердечной мышцы.

Реакции на патологические составные части мочи(белок. глюкоза, кровь, ацетоновые тела). Методы экспресс-диагностики.

На белок:

с сульфосалицил.к-той(выпад.хлопьеобраз.осадок)

• с азотной кислотой (кольцо помутнения)

  кол-венное определение нефелометрическим методом – степень помутнения р-ра(при взаимод.с ТХУ) пропорциональна концентрации белка. показания на ФЭКе.

р. Ниляндера (черный осадок висмута)

р. Фелинга (красный осадок закиси меди)

метод Альтгаузена – полуколичественный – нагревание глю с 10%NaOH- деструкция глю с образованием окраш.продуктов(окраска от желтой до коричневой)

На кровь:

Бензидиновая р. (сине-зеленое окраш.)

На кетоновые тела:

р. Легаля (оранжево-красное окрашивание, переходящее в вишневое)

Экспресс-методы:

проба на присутствие глю в моче

Метод основан на р.Фелинга. На предмет.стекло щепотку смеси сернокислой меди и углеродистого натрия. На порошок 2 кап исследуемой мочи и слегка подогрев на спиртовке. Изменеие окраски: от голубого(отсутствие), до кирпично-красного (4%и более)

экспресс-анализ на присутствие ацетоновых тел

Основан на р.с нитропруссидом натрия. Поместить на полоску филтров.бумаги таблетку или щепотку реактив.порошка(сернокислый аммоний, углекислый натрий и нитропруссид натрия), +2 кап мочи. Через 2 мин окраску сравнить со шкалой. Цвет не меняется – отсутствие кет.тел. Наличие – цвет от розового до фиолетового.

Индикан представляет собой калиевую или натриевую соль индоксил серной кислоты, образующейся в печени при обезвреживании индола. Индол, в свою очередь, образуется в кишечнике из триптофана при гниении белков.

В моче здорового человека индикан содержится в незначительных количествах и обычными лабораторными тестами не определяется.

Проба Обермейера

Принцип метода . В результате гидролиза эфирной связи сильной кислотой индикан превращается в индоксил, который, окисляясь хлоридом железа (III), превращается в синее индиго.

Реактивы . 1) ацетат свинца , 100 г/л раствора; 2) концентрированная соляная кислота с относительной плотностью 1,19; 3) хлорид железа (FeCl 3 × 6Н 2 O); 4) реактив Обермейера: 0,4 г FeCl 3 × 6Н 2 O растворяют в 100 мл концентрированной соляной кислоты; 5) хлороформ; 6) тиосульфат натрия (Na 2 S 2 O 3 × 5Н 2 O), 200 г/л раствора.

Ход определения . В пробирку вносят 4 мл мочи, прибавляют 0,4 мл раствора ацетата свинца для осаждения желчных пигментов, солей и других веществ, мешающих реакции. Фильтруют. 1–2 мл фильтрата смешивают с равным объемом реактива Обермейера и через 5 мин добавляют 0,5–1 мл хлороформа, пробирку закрывают пробкой и осторожно перемешивают содержимое, неоднократно переворачивая пробирку. Если слой хлороформа окрашивается в синий или красный цвет, его отсасывают и добавляют к нему 2–3 капли раствора тиосульфата натрия.

Оценка результатов . После добавления раствора тиосульфата натрия окраска не исчезает - проба положительна.

Проба Яффе

Принцип метода . В результате гидролиза эфирной связи сильной неорганической кислотой индикан превращается в индоксил, который, окисляясь перманганатом калия, превращается в синее индиго.

Реактивы : 1) 2% раствор перманганата калия (КMnO 4): 2 г перманганата растворяют в 98 мл дистиллированной воды; 2) концентрированная соляная кислота; 3) хлороформ (СНСl 3); 4) тиосульфат натрия (Na 2 S 2 O 3 × 5Н 2 O) кристаллический.

Ход определения . В химическую пробирку наливают 5–6 мл освобожденной от белка профильтрованной мочи, прибавляют равный объем концентрированной соляной кислоты и 2–3 мл хлороформа. К содержимому пробирки по каплям (!) добавляют 2% раствор перманганата калия (избыток перманганата приводит к окислению индиго в изатин желтого цвета). Пробирку закрывают пробкой и осторожно смешивают содержимое путем многократного (15–20 раз) ее переворачивания. При энергичном встряхивании может образоваться стойкая эмульсия, препятствующая разделению жидкости на слои. Пробирку устанавливают в штатив и через несколько минут учитывают реакцию по окраске слоя хлороформа, находящегося на дне.

Оценка результатов . При наличии индикана в моче хлороформ окрашивается в фиолетовый или синий цвет. При недостаточном добавлении перманганата калия (слабое окисление), приеме больными препаратов йода слой хлороформа окрашивается в розово-красные оттенки. Дифференцируют окраску, обусловленную приемом лекарственных средств, с помощью тиосульфатной пробы: при добавлении к пробе кристаллов тиосульфата натрия розовато-красный оттенок исчезает, окраска, зависящая от индиго, остается.

В некоторых случаях и у здоровых лиц хлороформ может окраситься в бледно-голубой цвет, что также принимают за норму.

Клиническое значение . Индикан в моче обнаруживается при непроходимости кишечника, спастических колитах, перитоните, когда создаются условия для усиления гнилостных процессов в кишечнике, а также при усиленном распаде белков в организме.

Индикан сыворотки крови

Индикан образуется в печени при обезвреживании индола - ядовитого вещества, появляющегося в кишечнике при гниении белков. Вот почему его содержание в сыворотке крови заметно возрастает при наличии гнилостных процессов в кишечнике. Это снижает его диагностическую ценность как признака почечной недостаточности.

У здоровых людей концентрация индикана в крови равна 0,87-3,13 мкмоль/л. С учетом возможных кишечных патологий врачи условно принимают, что их следствием может быть повышение концентрации индикана до 4,7 мкмоль/л. Если анализы дают более высокие показатели, ихсчитают признаком патологии почек.

Билирубин СЫВОРОТКИ КРОВИ

Билирубин образуется во всех клетках ретикулоэндотелиальной системы при распаде гемоглобина из погибших эритроцитов. Здесь вырабатывается так называемый непрямой, или свободный билирубин, циркулирующий в крови в виде комплекса с альбуминами. Он нерастворим в воде, токсичен и не проходит через почечный Фильтр. Этот пигмент дает цветную реакцию со специальным реактивом только после того, как будут осаждены связанные с ним альбумины, и поэтому называется непрямым. Кровь доставляет непрямой билирубин к клеткам печени. Здесь комплекс распадается, альбумины остаются в крови, а непрямой билирубин проникает в клетки печени, где преобразуется в прямой билирубин (сразу дающий цветную реакцию) и переходит с желчью в кишечник для выведения из организма. Из кишечника часть прямого билирубина всасывается в кровоток. В итоге в норме общее содержание билирубина в крови равно 8,5-20,5 мкмоль/л, причем 70% составляет непрямой и 30% - прямой билирубин.

Гипербилирубинемия - повышение содержания билирубина в крови - сопровождается желтушной окраской слизистых оболочек и кожных покровов. Различают легкую форму желтухи - при концентрации билирубина в крови до 86 мкмоль/л, среднетяжелую (87-159 мкмоль/л) и тяжелую (свыше 160 мкмоль/л). Гипербилирубинемия наблюдается при:

# увеличении интенсивности гемолиза (разложения гемоглобина);

# поражениях паренхимы (ткани) печени;

# застойных явлениях в печени и желчных путях.

Интенсивность гемолиза возрастает при гемолитических анемиях, гемолитической болезни новорожденных, В12-деФицитной анемии, талассемии, обширных гематомах.

Паренхиматозные желтухи развиваются при инфекционном или вирусном гепатитах, циррозе и других заболеваниях печени.

Застойные явления могут быть вызваны внепеченочной обдурацией поджелудочной железы, желчнокаменной болезнью, новообразованиями, гельминтозами и медикаментозной терапией

Прием молочной сыворотки При нефритах показано употребление молочной сыворотки (3–5 стаканов в